Quy trình công nghệ sản xuất protein p53 tái tổ hợp
Mục lục (Hiện)
- TS. Đinh Nho Thái
- ĐT: 0912048229
- dinhnhothai@hus.edu.vn
Tính năng và đặc trưng kỹ thuật
- Nhân bản đoạn gen mã hoá p53 ở người bằng PCR từ vector pUC-TAT-p53-His.
- Tạo vector pPICZαA-TAT-p53-His nhằm biểu hiện TAT-p53-His;
- Biến nạp plasmid tái tổ hợp pPICZαA-TAT-p53-His vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5α và Biến nạp pPICZαA-TAT-p53-His vào nấm men Pichia pastoris khả biến bằng xung điện.
- Cảm ứng biểu hiện p53 tái tổ hợp trong nấm men Pichia pastoris bằng 0.5-1% Methanol trong 72 giờ.
- Loại bỏ tế bào để thu dịch ngoại bào bằng ly tâm 3.000 rpm trong 10 phút
- Tăng nồng độ protein p53 tái tổ hợp bằng ly tâm sử dụng Vivaspin 20 và kiểm tra độ tinh sạch bằng SDS-PAGE.
