Quy trình tạo cơ chất peptide huỳnh quang đặc hiệu của protease HIV-1

• TS. Nguyễn Thị Hồng Loan
• ĐT: 0988266362
• 
  loannhbio@gmail.com

Cơ chất peptide huỳnh quang đặc hiệu của protease HIV-1 được thiết kế dựa trên một số nguyên tắc chính sau:

- Cơ chất peptide đặc hiệu của protease HIV-1 được thiết kế gồm 9 amino acid dựa trên vị trí cắt P6pol-PR trên chuỗi polyprotein Gag-Pol tiền thân của protease HIV-1;

- Cơ chất được thiết kế theo nguyên tắc truyền năng lượng cộng hưởng huỳnh quang FRET với cặp huỳnh quang HiLyte Flour 488-NH2/QXL 520 hấp thụ và phát quang tại Ex/Em = 488 nm/520 nm;

- QXL 520 chỉ bền khi gắn với gốc Ser qua nhóm γ-aminobutyric acid (GABA) nên được liên kết với Ser có sẵn tại đầu N của Peptide HF; trong khi gốc Leu tại đầu C được thay thế bởi gốc Lys liên kết với HiLyte Fluor 488;

- Trình tự cơ chất peptide huỳnh quang đặc hiệu của protease HIV-1: QXL 520-GABA-SFNFPQITK-HiLyte Flour 488-NH2 (ký hiệu Peptide HF);

- Peptide HF sau đó được đặt tổng hợp bởi Hãng Anaspec (Mỹ) và có độ tinh sạch >95% (HPLC).